Тест на оксид азота при астме

Дышите — не дышите! На что жалуетесь?
— На мышей…
— Мышите — не мышите!
(Приключения кота Леопольда)

Для диагностики бронхиальной астмы и аллергического ринита пульмонологи и аллергологи часто назначают процедуру определения уровня оксида азота в выдыхаемом воздухе.

Моего ребенка этот тест также не обошел стороной. Прежде чем перейду к описанию самого метода, расскажу как проходили тест мы.

По заключению исследования функции внешнего дыхания (ФВД), у моего ребенка нет бронхиальной астмы. Но он находится в группе риска из-за обструкции, в том числе вирусозависимых. Чтобы снизить риск возникновения астмы, бронхи моего ребенка постоянно контролируются врачом.

После каждой ОРВИ, которая проходит у нас с обструкцией, мы обязательно делаем ФВД (маленьким деткам можно сделать бронхофонографию), чтобы полностью исключить недолеченное воспаление в бронхах, скрытый бронхоспазм, который обычным стетоскопом не всегда слышно.

После нашей последней обструкции, пульмонолог — аллерголог, вместо ФВД, предложила сделать тест на оксид азота.

Процедура быстрая, но не такая простая для ребенка, как описывается в интернете.

Для моего шестилетнего сына она оказалась сложнее чем ФВД.

В течение 7-9 секунд надо дуть в трубочку, удерживая шарик-маркер в определенном диапазоне на тестовой шкале. На первый взгляд, ничего сложного, но у нас не получилось с первого раза. Со второго раза тоже не получилось ?

Затем врач сверяет показания прибора с референтными значениями. У нас было 2 — это результат ребенка со здоровыми бронхами. Чем выше цифра, тем хуже результат.

Посмотрите видео для наглядности

Измерение оксида азота в выдыхаемом воздухе — специальный тест который может помочь в диагностике бронхиальной астмы и контроля ее лечения.

Тест абсолютно безболезненный, он проводится при помощи специального аппарата — газоанализатора

Предварительные научные исследования показали, что при бронхиальной астме, хронической обструктивной болезни легких и некоторых других заболеваниях в организме человека повышается уровень оксида азота.

Таким образом, повышенный уровень оксида азота может быть свидетельством воспалительных процессов в нижних дыхательных путях.

Контроль уровня оксида азота позволяет оценить степень тяжести болезни и наблюдать за процессом в динамике.

В тоже время, этот тест не может быть единственным способом диагностирования бронхиальной астмы. Для подтверждения диагноза необходимо использовать и другие методы исследований.

Исследование на уровень оксида азота назначают в следующих случаях:

• для выявления причины затяжного кашля у детей и взрослых;
• для выявления эозинофильного бронхита у людей с затяжным кашлем, без изменений ФВД;
• для оценки эффективности противовоспалительной терапии, в первую очередь ингаляционных ГКС, что позволяет безопасно корректировать дозы принимаемых препаратов;
• для контроля выполнения больным рекомендаций по противовоспалительной терапии;
• для обнаружения пневмонии;
• для точного подтверждения или исключения диагноза «бронхиальная астма»;
• для прогноза и профилактики обострений астмы;
• для выявления больных, которые не нуждаются в назначении базовой терапии бронхиальной астмы.

Тест необходим для подтверждения диагноза и мониторинга при следующих заболеваниях:

• Бронхиальная астма;
• Атопическая астма;
• Хронический бронхит;
• Хроническая обструктивная болезнь легких;
• Пневмония;
• Эозинофильный бронхит;
• Идиопатический фиброзирующий альвеолит;
• Силикоз — наиболее распространенный и тяжело протекающий вид пневмокониоза, профессиональное заболевание легких;
• ХОБЛ (Хроническая обструктивная болезнь легких);
• Аллергический ринит.

Исследование не требует специальной подготовки и проводится на приеме у врача-пульмонолога. Процедуру лучше всего проходить натощак или спустя 3–5 часов после приема пищи.

Если вы принимаете бронхорасширяющие препараты короткого действия, то их отменяют за 6 часов до исследования, а при использовании препаратов длительного действия – за 12 часов.

За 3 — 5 часов до проведения теста желательно отказаться от курения и крепкого кофе. Более подробные рекомендации вам пропишет лечащий врач.

источник

Бронхиальная астма – диагноз клинический, то есть врач ставит его на основании прежде всего жалоб, истории заболевания и данных осмотра и внешнего исследования (пальпации, перкуссии, аускультации). Однако дополнительные методы исследования дают ценную, а в некоторых случаях определяющую диагностическую информацию, поэтому они широко применяются на практике.

Диагностика бронхиальной астмы с помощью дополнительных методов включает проведение лабораторных анализов и инструментальных исследований.

Пациенту с астмой могут быть назначены следующие анализы:

• общий анализ крови;
• биохимический анализ крови;
• общий анализ мокроты;
• анализ крови для выявления общего IgE;
• кожные пробы;
• определение в крови аллергенспецифических IgE;
• пульсоксиметрия;
• анализ крови на газы и кислотность;
• определение оксида азота в выдыхаемом воздухе.

Разумеется, не все эти тесты выполняются у каждого больного. Некоторые из них рекомендуются лишь при тяжелом состоянии, другие – при выявлении значимого аллергена и так далее.

Общий анализ крови выполняется у всех пациентов. При бронхиальной астме, как и при любом другом аллергическом заболевании, в крови отмечается увеличение количества эозинофилов (EOS) более 5% от общего количества лейкоцитов. Эозинофилия в периферической крови может возникать не только при астме. Однако определение этого показателя в динамике (повторно) помогает оценить интенсивность аллергической реакции, определить начало обострения, эффективность лечения. В крови может определяться незначительный лейкоцитоз и увеличение скорости оседания эритроцитов, однако это необязательные признаки.

Биохимический анализ крови у больного с астмой часто никаких отклонений не выявляет. У некоторых пациентов отмечается увеличение уровня α2- и γ-глобулинов, серомукоида, сиаловых кислот, то есть неспецифических признаков воспаления.

Обязательно проводится анализ мокроты. В ней находят большое количество эозинофилов – клеток, участвующих в аллергической реакции. В норме их меньше 2% от всех обнаруженных клеток. Чувствительность этого признака высокая, то есть он обнаруживается у большинства больных с астмой, а специфичность средняя, то есть, помимо астмы, эозинофилы в мокроте встречаются и при других заболеваниях.

В мокроте нередко определяются спирали Куршмана – извитые трубочки, образующиеся из бронхиальной слизи при спазме бронхов. В них вкраплены кристаллы Шарко-Лейдена – образования, которые состоят из белка, образующегося при распаде эозинофилов. Таким образом, два этих признака говорят о снижении бронхиальной проходимости, вызванном аллергической реакцией, что часто и наблюдается при астме.

Кроме того, в мокроте оценивается наличие атипичных клеток, характерных для рака, и микобактерий туберкулеза.

Анализ крови на общий IgE показывает уровень в крови этого иммуноглобулина, который вырабатывается в ходе аллергической реакции. Он может быть повышен при многих аллергических заболеваниях, но и нормальное его количество не исключает бронхиальную астму и другие атопические процессы. Поэтому гораздо более информативным является определение в крови специфических IgE – антител к конкретным аллергенам.

Для анализа на специфические IgE используются так называемые панели – наборы аллергенов, с которыми реагирует кровь больного. Тот образец, в котором содержание иммуноглобулина будет выше нормы (у взрослых это 100 ед/мл), и покажет причинно-значимый аллерген. Используются панели шерсти и эпителия разных животных, бытовые, грибковые, пыльцевые аллергены, в некоторых случаях – аллергены лекарств и пищевые.

Для выявления аллергенов применяются и кожные пробы. Их можно проводить у детей любого возраста и у взрослых, они не менее информативны, чем определение IgE в крови. Кожные пробы хорошо себя зарекомендовали в диагностике профессиональной астмы. Однако при этом существует риск внезапной тяжелой аллергической реакции (анафилаксии). Результаты проб могут меняться под действием антигистаминных препаратов. Их нельзя проводить при кожной аллергии (атопическом дерматите, экземе).

Пульсоксиметрия – исследование, проводимое с помощью небольшого прибора – пульсоксиметра, который обычно надевается на палец пациента. Он определяет насыщение артериальной крови кислородом (SpO₂). При снижении этого показателя менее 92% следует выполнить исследование газового состава и кислотности (рН) крови. Снижение уровня насыщения крови кислородом свидетельствует о тяжелой дыхательной недостаточности и угрозе для жизни больного. Определяемое при исследовании газового состава снижение парциального давления кислорода и увеличение парциального давления углекислого газа свидетельствует о необходимости искусственной вентиляции легких.

Наконец, определение оксида азота в выдыхаемом воздухе (FENO) у многих больных с астмой выявляет увеличение этого показателя выше нормы (25 ppb). Чем сильнее воспаление в дыхательных путях и больше доза аллергена, тем показатель выше. Однако такая же ситуация бывает и при других болезнях легких.

Таким образом, специальные лабораторные методы диагностики астмы – кожные пробы с аллергенами и определение в крови уровня специфических IgE.

Методы функциональной диагностики бронхиальной астмы включают:

• исследование вентиляционной функции легких, то есть способности этого органа доставлять необходимое количество воздуха для газообмена;
• определение обратимости бронхиальной обструкции, то есть снижения проходимости бронхов;
• выявление гиперреактивности бронхов, то есть их склонности к спазму под действием вдыхаемых раздражителей.

Основной метод исследования при бронхиальной астме – спирометрия, или измерение дыхательных объемов и скоростей воздушных потоков. С него обычно начинается диагностический поиск еще до начала лечения больного.

Главный анализируемый показатель – ОФВ₁, то есть объем форсированного выдоха за секунду. Проще говоря, это количество воздуха, которое человек способен быстро выдохнуть в течение 1 секунды. При спазме бронхов воздух выходит из дыхательных путей медленнее, чем у здорового человека, показатель ОФВ₁ снижается.

Если при первичной диагностике уровень ОФВ₁ составляет 80% и больше от нормальных показателей, это говорит о легком течении астмы. Показатель, равный 60 – 80% от нормы, появляется при астме средней тяжести, менее 60% – при тяжелом течении. Все эти данные применимы только к ситуации первичной диагностики до начала терапии. В дальнейшем они отражают не тяжесть астмы, а уровень ее контроля. У людей с контролируемой астмой показатели спирометрии в пределах нормы.

Таким образом, нормальные показатели функции внешнего дыхания не исключают диагноз «бронхиальная астма». С другой стороны, снижение бронхиальной проходимости обнаруживается, например, при хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ).

Если обнаружено снижение бронхиальной проходимости, то важно выяснить, насколько оно обратимо. Временный характер бронхоспазма – важное отличие астмы от того же хронического бронхита и ХОБЛ.

Итак, при снижении ОФВ₁ для выявления обратимости бронхиальной обструкции проводятся фармакологические тесты. Пациенту дают препарат посредством дозированного аэрозольного ингалятора, чаще всего 400 мкг сальбутамола, и через определенное время снова проводят спирометрию. Если показатель ОФВ₁ увеличился после использования бронхолитика на 12% и больше (в абсолютных цифрах на 200 мл и больше), говорят о положительной пробе с бронходилататором. Это означает, что сальбутамол эффективно снимает спазм бронхов у данного пациента, то есть бронхиальная обструкция у него непостоянна. Если показатель ОФВ₁ увеличивается менее чем на 12%, это признак необратимого сужения бронхиального просвета, а если он уменьшается, это говорит о парадоксальном спазме бронхов в ответ на использование ингалятора.

Прирост ОФВ₁ после ингаляции сальбутамола на 400 мл и больше дает практически полную уверенность в диагнозе «бронхиальная астма». В сомнительных случаях может быть назначена пробная терапия ингаляционными глюкокортикоидами (беклометазон по 200 мкг 2 раза в день) в течение 2 месяцев или даже таблетками преднизолона (30 мг/сут) в течение 2 недель. Если показатели бронхиальной проходимости после этого улучшаются – это говорит в пользу диагноза «бронхиальная астма».

В некоторых случаях даже при нормальных показателях ОФВ₁ применение сальбутамола сопровождается приростом его величины на 12% и больше. Это говорит о скрытой бронхиальной обструкции.

В других случаях нормальной величины ОФВ₁ для подтверждения гиперреактивности бронхов применяют ингаляционную пробу с метахолином. Если она будет отрицательной, это может служить причиной для исключения диагноза астмы. Во время исследования пациент вдыхает возрастающие дозы вещества, и определяется минимальная концентрация, которая вызывает снижение ОФВ₁ на 20%.

Применяются и другие пробы для выявления гиперреактивности бронхов, например, с маннитолом или физической нагрузкой. Падение ОФВ₁ в результате использования этих проб на 15% и более с высокой степенью достоверности указывает на бронхиальную астму. Проба с физической нагрузкой (бег в течение 5 – 7 минут) широко применяется для диагностики астмы у детей. Применение ингаляционных провокационных проб у них ограничено.

Еще один важнейший метод инструментальной диагностики астмы и контроля за ее лечением – пикфлоуметрия. Пикфлоуметр должен быть у каждого пациента с этим заболеванием, ведь самоконтроль – основа эффективной терапии. С помощью этого небольшого аппарата определяют пиковую скорость выдоха (ПСВ) – максимальную скорость, с которой пациент может выдохнуть воздух. Этот показатель, так же как и ОФВ₁, прямо отражает бронхиальную проходимость.

ПСВ можно определять у больных начиная с 5-летнего возраста. При определении ПСВ делается три попытки, записывается лучший показатель. Измеряют величину показателя утром и вечером каждого дня, а также оценивают его вариабельность – разницу между минимальным и максимальным значениями, полученными в течение дня, выраженную в процентах от максимальной величины за день и усредненную за 2 недели регулярных наблюдений. Для людей с бронхиальной астмой характерна повышенная вариабельность показателей ПСВ – более 20% при четырех измерениях в течение дня.

Показатель ПСВ используется преимущественно у людей с уже установленным диагнозом. Он помогает держать астму под контролем. В течение наблюдений определяют максимальный лучший показатель для данного больного. Если отмечается снижение до 50 – 75% от наилучшего результата – это говорит о развивающемся обострении и необходимости усилить интенсивность лечения. При снижении ПСВ до 33 – 50% от лучшего для пациента результата диагностируют тяжелое обострение, а при более значительном уменьшении показателя возникает угроза жизни больного.

Определяемый дважды в день показатель ПСВ нужно записывать в дневник, который приносят на каждый прием к врачу.

В некоторых случаях проводятся дополнительные инструментальные обследования. Рентгенография легких выполняется в таких ситуациях:

• наличие эмфиземы легких или пневмоторакса;
• вероятность воспаления легких;
• обострение, несущее угрозу жизни больного;
• неэффективность лечения;
• необходимость искусственной вентиляции легких;
• неясный диагноз.

У детей младше 5 лет используется компьютерная бронхофонография – метод исследования, основанный на оценке дыхательных шумов, и позволяющий выявить снижение бронхиальной проходимости.

При необходимости дифференциальной диагностики с другими заболеваниями выполняют бронхоскопию (осмотр бронхиального дерева с помощью эндоскопа при подозрении на рак бронхов, инородное тело дыхательных путей) и компьютерную томографию органов грудной клетки.

О том, как проводится исследование функции внешнего дыхания:

источник

И Измерение оксида азота в выдыхаемом воздухе — экспресс диагностика бронхиальной астмы – современная диагностика на молекулярном уровне!

Измерение FeNO рекомендовано европейскими протоколами для оценки воспаления дыхательных путей при астме. Монитор NObreath® FeNО — неинвазивный метод определения уровня оксида азота в выдыхаемом воздухе.

— Установить диагноз аллергической бронхиальная астма – даже при минимальных проявлениях болезни

— Исключить диагноз атопической бронхиальной астмы

— Выявить причину затяжного кашля у детей и взрослых

— Прогноз и профилактика обострений астмы

— Контроль за терапией астмы ингаляционными стероидами

— Выявлять эозинофильный бронхит у пациентов с затяжным кашлем, без изменений ФВД (спирометрии).

1. Неинвазивный, быстрый и удобный в работе.
2. Показывает ответ пациента на лечение, позволяя безопасно корректировать дозы препаратов, которые используются для базовой терапии бронхиальной астмы.
3. Доказано, что есть диагностические преимущества перед большинством обычных тестов для диагностики функции легких, таких как запись пикового потока и спирометрия.
4. Помощь в дифференциальной диагностики фенотипа бронхиальной астмы — аллергической (эозинофильной) и неаллергической.

Для диагностики бронхиальной астмы применяются стандартные исследования, включающие спирометрию с бронхолитиком и аллерго-иммунологические тесты. Но не всегда эти тесты дают ответ – болеет человек астмой или нет. И тут на помощь приходят современные технологии.

Измерение оксида азота в выдыхаемом воздухе — специальный тест диагностики бронхиальной астмы и контроля ее лечения. Программа Экспресс диагностики бронхиальной астмы* состоит из теста измеряющего оксид азота в выдыхаемом воздухе. Позволяет почти мгновенно выявить или исключить аллергическое (атопическое) воспаление в бронхах**, лежащее в основе бронхиальной астмы.

*тест не является окончательным диагнозом. Постановка диагноза может потребовать участия врача.

**нормальный уровень FeNO не исключает диагноза неэозинофильной бронхиальной астмы

В нашей клинике используется прибор последнего поколения NObreath, произведено компанией Bedfont Scientific: Пациент выдыхает из легких воздух в специальный, портативный прибор — газоанализатор. Прибор в течение 8 секунд выдает результат, который оценивает наш пульмонолог. Тест бескровный и безболезненный.

Надо ли специально готовиться к проведению теста? Для успешного проведения теста необходимо:

1. Осознанное выполнение пациентом дыхательного маневра — выдохнуть в специальный мундштук. Таких усилий, как при ФВД не требуется.
2. За сутки до исследования курильщики прекращают курить!
3. Процедуру лучше всего проходить натощак или спустя 3–5 часов после приема пищи. На это же время желательно отказаться от курения и крепкого кофе.
4. Если вы принимаете бронхорасширяющие препараты короткого действия, то их отменяют за 6 часов до исследования, а при использовании препаратов длительного действия – за 12 часов.

1. Диагностика астмы — позволяет исключить или подтвердит этот диагноз. Особенно при «смазанной», нечеткой клинической картине и отсутствии обструктивных нарушений при проведении ФВД.
2. Контроль лечения астмы глюко-кортикостероидами. У пациентов с астмой уровень FeNO в выдыхаемом воздухе повышен. При лечении ингаляционными глюкокортикостероидами уровень приходит в норму.
3. Для прогнозирования обострений бронхиальной астмы и проведения их профилактики.
4. Для выявления причины затяжного кашля, не сопровождающегося изменением функции внешнего дыхания.
5. Измерение оксида азота в выдыхаемом воздухе эффективно при диагностике или дифференциальной диагностике легочных заболеваний неинфекционного происхождения.

Хорошо «работает» в совокупности с измерением уровня эозинофилов в крови, а также в комплексе с лабораторной аллергодиагностикой (определение IgE).

Контроль уровня оксида азота позволяет объективно контролировать ход лечения пациента ингаляционными глюкокортикостероидами, понимать природу обострений астмы у пациентов с установленным диагнозом. Также оксид азота актуален для пациентов с ХОБЛ и бронхоэктазами, при наличии у них бронхиальной астмы.

В дыхательной системе азотная окись (NO) регулирует сосудистый и бронхиальный тонусы (способствует расширению и судов и дыхательных путей), облегчает скоординированное движение реснитчатого эпителия бронхов и действует как важный нейромедиатор для неадренергических, нехолинергических нейронов. Считается, что эозинофильное воспаление в бронхах приводит к повышенной продукции оксида азота, таким образом, делая оксид азота (FeNO) полезным маркером, чтобы контролировать это воспаление. Так же было отмечено, что увеличение концентрации NO в выдыхаемом воздухе является ранним признаком начала аллергического воспаления в слизистой нижних дыхательных путей. Так же было отмечено, что увеличение концентрации NO в выдыхаемом воздухе является наиболее ранним признаком начала аллергического воспаления в слизистой нижних дыхательных путей. Таким образом, оксид азота является своеобразным маркером протекающих воспалительных и иных патологических процессов в лёгких и бронхах.

В нашем медицинском центре проводятся следующие процедуры:

Первичный прием пульмонолога 850 руб.

Повторный прием пульмонолога 600 руб.

Спирография с бронхолитическим тестом 1250 руб.

Прием + спирография с бронхолитическим тестом 1650 руб.

Определение оксида азота 400 руб.

Определение оксида углерода 300 руб.

Записаться на прием к специалистам можно по телефону (8112) 20-11-11.

г. Псков, Октябрьский пр., 54 (вход с улицы Вокзальная).

источник

Повышенный выдыхаемый оксид азота при аллергии, вызванной астмой, ассоциируется с эпитомией дыхательных путей iNOS

Конкурирующие интересы: AR получила плату лектора от Boehringer Ingelheim и гранты на поездки от R & D AstraZeneca. MN является полноправным сотрудником R & D AstraZeneca. AR, JG и MN получили исследовательские гранты от исследований и разработок AstraZeneca. Патентов, продуктов в разработке или продаваемых продуктов не существует. Это не изменяет приверженность авторов ко всем политикам PLOS ONE по обмену данными и материалами.

Задуманные и разработанные эксперименты: AR H-EC JW AE JG JSE JOL MN. Проводили эксперименты: AR MM RG CÖ AE. Проанализированы данные: AR MM CÖ JSE JOL MN. Используемые реагенты / материалы / инструменты анализа: H-EC AE JG JSE JOL MN. Написал документ: AR MM CÖ H-EC JW AE JG JSE JOL MN.

Дробный выдыхаемый оксид азота повышен при аллергии, вызванной аллергеном. Однако клеточный и молекулярный источник повышенного фракционного выдыхаемого оксида азота является неопределенным.

Чтобы исследовать, связан ли фракционный выдыхаемый оксид азота с повышенной эпителиальной индуцибельной синтазой оксида азота (iNOS) при аллергической астме.

Дробный выдыхаемый оксид азота измерялся при здоровом контроле (n = 14) и аллергических астматиках (n = 12), до и после бронхиальной провокации до пыльцы березы вне сезона. Бронхоскопия была выполнена до и через 24 часа после провокации аллергенов. Бронхиальная биопсия и биопсия кисти были обработаны при окрашивании активности синтазы оксида азота с помощью никотинамидадениндинуклеотидфосфатной диафоразы (NADPH-d), иммуноокрашивания iNOS или анализа экспрессии генов iNOS с помощью ПЦР в реальном времени. Окрашивание NADPH-d и iNOS определяли количественно с использованием автоматизированного морфометрического анализа.

Дробный выдыхаемый оксид азота и экспрессия мРНК iNOS были значительно выше у не спровоцированных астматиков по сравнению с здоровыми контролями. Аллергические астматики проявили значительное повышение фракционного выдыхаемого оксида азота после провокации аллергенов, а также накопление эозинофилов дыхательных путей. Кроме того, активность синтазы оксида азота и экспрессия iNOS были значительно увеличены в бронхиальном эпителии астматиков после провокации аллергена. Дробный выдыхаемый оксид азота коррелирует с эозинофилами и экспрессией iNOS.

Более высокая фракционная выдоха концентрация оксида азота среди астматиков связана с повышенной мРНК iNOS в бронхиальном эпителии. Кроме того, наши данные впервые демонстрируют повышенную экспрессию и активность iNOS в бронхиальном эпителии после провокации аллергена и, таким образом, обеспечивают механическое объяснение повышенного фракционного выдыхаемого оксида азота при вызванной аллергеном астме.

Аллергическая астма характеризуется гиперреактивностью дыхательных путей и изменчивой обструкцией воздушного потока, вызванной аномальной воспалительной реакцией на чужеродные антигены, и наличием специфичного для аллергена сывороточного IgE. Тревожно, что распространенность аллергической астмы возрастает [1]. Расширение знаний о механизмах, способствующих аллергической астме и улучшении мониторинга заболеваний, является ключевым фактором для предотвращения увеличения заболеваемости и смертности и ограничения роста расходов на здравоохранение. Дробный выдыхаемый оксид азота (FENO) является проверенным маркером воспаления дыхательных путей [2] — [4], который коррелирует с эозинофилией дыхательных путей [5], что указывает на особую актуальность для лечения астмы. Недавние исследования также свидетельствуют об увеличении FENO после аллергенной провокации аллергических астматиков [6], [7]. Однако механизмы, лежащие в основе повышения уровня FENO, вызванного аллергеном, остаются неизвестными. Предполагается, что активность индуцибельной синтазы оксида азота (iNOS / NOS2) в эпителии дыхательных путей является наиболее важным определяющим фактором для концентрации FENO при стабильной астме [8] — [10]. Таким образом, мы предположили, что повышенное FENO при аллергической астме связано с увеличением экспрессии iNOS.

В этом исследовании мы обнаружили, что повышенное FENO в астматиках после провокации аллергена ассоциировалось с повышенным эпителиальным окрашиванием никотинамидадениндинуклеотидфосфатной диафоразы (NADPH-d), выявлением активности оксида азота (NO) -синтазы [11], а также повышенной иммунореактивностью для iNOS в бронхиальном эпителии. Таким образом, мы здесь впервые предоставили механистическое объяснение повышенных уровней FENO при вызванной аллергеном астме, лежащей в основе использования FENO для мониторинга атопической астмы и улучшения ухода за этим распространенным и тяжелым заболеванием.

12 легких атомических астматиков с аллергически-специфическим IgE к пыльце березы (≥2 кU / л, возраст 22-42 года, 7 женщин) и 14 неаллергических здоровых добровольцев (возраст 23-46 лет, 8 женщин) были завербованы в легкие и клиника аллергии в Каролинской университетской больнице в Солне, Швеция (таблица 1). У всех здоровых добровольцев была отрицательная реакция (≤0,35 кU / л) на смесь общих ингаляционных аллергенов (Phadiatop, Immuno CAP System, Phadia AB, Уппсала, Швеция), и все астматические субъекты были бессимптомными и использовали вдыхаемые β2-агонисты по мере необходимости только. Был применен четырехнедельный период вымывания для ингаляционных кортикостероидов и двухнедельный период вымывания антигистаминов, анти-лейкотриенов и НПВП. Ни у одного из пациентов не было обострения или респираторной инфекции в течение четырех недель до отбора проб. Подробное описание клинических параметров было опубликовано ранее [12]. Участие было добровольным, и все субъекты предоставили письменное согласие. Протокол и информация были одобрены местным комитетом по этике (The Ethical Review Board в Стокгольме).

F, женщина; M, мужчина; FEV1%, объем принудительного выдоха за одну секунду — процент прогнозируемого нормального; SQ, произвольные единицы, относящиеся к концентрации аллергена; PD20, провокационная доза, вызывающая 20% -ное падение FEV1; SD, стандартное отклонение; Н. Д., не сделано; RAST, радиоаллергерсорбентный тест.

Объемы выдоха измерялись с помощью динамического спирометра (Vitalograph®, Buckingham, UK) стандартизированным образом. Определены как принудительный объем выдоха за одну секунду (FEV1), так и принудительная жизненная емкость (FVC). FENO измеряли до, через 1 час и 24 часа после бронхиальной провокации, согласно ранее описанному протоколу [13]. Фиброоптическая бронхоскопия выполнялась, как описано в другом месте [14]. Все испытуемые, включенные в исследование, прошли медицинское обследование не менее чем за 2 недели до бронхоскопии, включая рентгенограмму грудной клетки и анализ крови. Через минимум 3 недели после первой бронхоскопии астматикам подвергали бронхопроцедуру с индивидуально адаптированными дозами экстракта березовой пыльцы (Aquagen SQ, ALK, Копенгаген, Дания), как описано ранее [15], [16]. Провокация проводилась вне сезона пыльцы. Бронхопровокация была прекращена, когда наблюдалось снижение FEV1≥20% от исходной линии после разбавителя, как описано в другом месте [16]. Вторая бронхоскопия была выполнена в течение 24 часов после аллергенных провокаций. Бронхоальвеолярный лаваж (БАЛ) выполняли, как подробно описано другими [13].

Общий и дифференциальный подсчет клеток были подготовлены, как описано ранее [17]. Зафиксированные биопсии бронхов, собранные во время бронхоскопии, были встроены в OCT (Tissue-Tek, Miles Laboratories, IN) и были созданы 10-криовые секции. РНК была получена из клеток, полученных путем бронхиальной чистки с использованием RNeasy Mini (Qiagen, Hilden, Germany) и набора большой емкости с РНК-кДНК (Applied Biosystems, Carlsbad, CA), для транскрипции РНК в кДНК. Целостность РНК оценивали на 2100 Agilent Bioanalyser (Agilent Technology Inc., Santa Clara, CA) с использованием Agilent RNA 6000 Nano Kit (Agilent). Деградированные образцы были исключены из анализа.

Секции крио, где можно было идентифицировать эпителий интактного дыхательного пути (n = 9), сушили на воздухе в течение 20 минут при комнатной температуре и фиксировали в 1% параформальдегиде в течение 10 минут. Биопсии без идентифицированного эпителия дыхательных путей были исключены из анализа. Окрашивание NADPH-d проводили, как описано в другом месте [18]. Разделы для иммуноокрашивания iNOS промывали в промывочном буфере (K8007, Dako, Glostrup, Дания). Поиск антигена проводили в модуле предварительной обработки Dako при 97 ° С в течение 20 минут с буфером для поиска антигена, pH 6,1 (EnVision ™ FLEX Target Retrieval Solution, K8005, Dako). Иммуноокрашивание для iNOS было выполнено с использованием набора EnVision ™ Peroxidase / DAB Detection System (Rabbit / Mouse K5007, Dako) с автоматическим слайдером (Autostainer Plus, DakoCytomation, Glostrup, Дания) в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, эндогенную активность пероксидазы блокировали 0,3% перекисью водорода в течение 10 минут с последующей стадией блокирования в растворе свободной белковой сыворотки Dako Protein (X0909) в течение дополнительных 10 минут. Секции тканей инкубировали с первичным кроличьим поликлональным антителом NO-53 (1:7000, добрый подарок от John L. Humes, Merck, США), направленным против C-концевого iNOS-пептида человека с 6 аминокислотами в течение 1 часа с последующей инкубацией с кроличьим полимером / HRP-связанным вторичным антителом в течение 30 минут. 3,3′-диаминобензидин (DAB) применяли в течение 10 минут для обнаружения иммунореактивности. Секции ткани впоследствии контрастировали с гематоксилином Майера, обезвоживали и монтировали с Pertex (HistoLab, Gothenburg, Sweden). Специфичность иммуноокрашивания подтверждается отсутствием окрашивания после удаления первичного антитела. Окрашивание для NADPH-d или iNOS проводилось одновременно на всех участках, чтобы избежать изменчивости интенсивности окрашивания.

Цифровые изображения с высоким разрешением образцов тканей были созданы из всех разделов с использованием сканера ScanScope Slide Scanner (Aperio Technologies, Vista, CA). Морфометрические анализы выполнялись с использованием программного обеспечения Aperio ImageScope v.10.0 (Aperio Technologies). На каждом участке интактный эпителий дыхательных путей был вручную очерчен, а порог пикселя для позитивности был установлен, чтобы включать только положительные окрашенные пиксели (соответствующие иммунореактивности iNOS или окрашиванию NADPH-d) с использованием алгоритма Aperio Positive Pixel Count алгоритма v.9 (Aperio Technologies). Для окрашенных слайдов NADPH-d порог интенсивности был установлен как включающий только сильные положительные клетки (исключая фоновый сигнал). Образцы, в которых невозможно идентифицировать интактный эпителий дыхательных путей, не были исключены. Эпителиальные клетки, отделенные от базальной мембраны, были исключены из анализа. Процент эпителия дыхательных путей, занимаемого окрашиванием iNOS или NADPH-d, рассчитывали исследователем, ослепленным протоколом, используя количество иммуноположительных пикселей выше выбранного порога и общее количество пикселей (то есть иммуноположительное и отрицательное).

Анализ экспрессии генов NOS2 и NOS3 проводили в дубликатах на термоциклере 7900HT (Applied Biosystems, Carlsbad, CA). Уровни экспрессии были нормированы на глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназу (GAPDH). Все праймеры и зонды были приобретены у Cybergene (Стокгольм, Швеция).

источник

Совсем недавно впервые в истории медицины доктора Мария Белвизи, Питер Барнз и их коллеги из Национального института сердца и легких Великобритании продемонстрировали, что механизм, сохраняющий бронхиолы легких открытыми, в значительной степени контролируется окисью азота.

В 1993 году доктора Барнз и Белвизи восторженно сообщили в журнале Тпогах: Даже пять лет назад всего несколько человек могли себе позволить предположить, что простая окись азота (NO) участвует в регулировании работы стольких физиологических функций. В статье описывалось образование газа из аминокислоты L-аргинина клетками, выстилающими легкие, и макрофагами, — формами ферментов, необходимых для его производства. В ней говорилось о роли окиси азота в релаксации кровеносных сосудов и расширении мельчайших воздухоносных путей легких, называемых бронхиолами. Это стало серьезным шагом вперед в нашем понимании роли окиси азота в возникновении астмы.

Другая группа исследователей из Великобритании также сообщила об образовании окиси азота в выстилке воздухоносных путей легких. Ученые предположили, что при астме это позволяло противодействовать сужению бронхиол. В то же время научные исследования, проведенные шведскими специалистами, показа участия в газообмене, представляется нам чрезмерно упрощенной. Астма является тем фактором, который позволяет нам наилучшим образом осмыслить глубину всей сложности данного вопроса.

В настоящее время доказано, что удовлетворение потребностей организма в окиси азота путем ингаляций может оказывать терапевтическое влияние при других связанных с легкими заболеваниях, включая легочную гипертонию и респираторный дистресс-синдром.

Доктор Харитонов совместно с коллегами из детской больницы в Вене сообщили о том, что применение L-аргинина в качестве пищевой добавки, из которой клетки дыхательных путей выделяют окись азота, существенно повысило содержание этого газа в выдыхаемом воздухе.

Они сравнили результаты приема трех различных дозировок L-аргинина группой здоровых людей с результатами, полученными в контрольной группе лиц, принимавших плацебо, и обнаружили, что наибольшая доза L-аргинина вызвала значительное увеличение концентрации окиси азота в выдыхаемом воздухе. Максимальный уровень концентрации сохранялся еще примерно 2 часа после приема пищевой добавки. У пациентов не произошло никаких значительных изменений в частоте сердечного ритма и кровяном давлении. Только один из них не почувствовал облегчения.

Значение полученных результатов приобретает еще большую весомость из-за сделанного в ходе исследования вывода о том, что прием L-аргинина в виде пищевой добавки увеличивает выработку организмом и легкими окиси азота и что это может найти применение в терапии заболеваний, при которых окись азота вырабатывается в недостаточных количествах, например при астме.

О пищевых аллергенах и других раздражителях вроде пыльцы растений, шерсти и перхоти животных мы уже говорили. Тем не менее, я приведу из списка доктора Эггера и его коллег те продукты, которые с наибольшей долей вероятности способны спровоцировать приступ.

• коровье молоко и сыр;
• цитрусовые;
• пшеница;
• пищевые добавки (тартразин и бензойная кислота);
• куриные яйца;
• помидоры;
• шоколад;
• кукуруза;
• виноград.

В соответствии с методом поведенческой терапии лечение астмы ведется по трем направлениям:

Уменьшение количества известных раздражителей в воздухе и пище;

Отказ от нагрузок, требующих значительного мышечного напряжения, самоанализ и релаксация;

Дыхательная гимнастика, направленная на повышение эффективности дыхательного процесса, на восстановление контроля над мускулатурой диафрагмы и грудной клетки и степени мышечного напряжения (тонуса).

С психологической точки зрения снижение частоты и интенсивности приступов астмы приносит больным дополнительную пользу, вселяя надежду и уверенность в себе.

источник

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему: Изучение метаболизма оксида азота при бронхиальной астме

1.1. Распространенность бронхолегочных заболеваний.

1.2. Метаболизм оксида азота при бронхолегочных заболеваниях.

1.2.1. Синтез оксида азота в организме.

1.2.3. Биохимия оксида азота.

1.2.4. Роль оксида азота в организме.

1.2.5. Изменение метаболизма N0 при бронхолегочных заболеваниях.

1.3. Конденсат выдыхаемого воздуха в диагностике бронхолегочных патологий.

1.3.1 Клинико-диагностические корреляции при исследовании КВВ.

1.4. Методы определения содержания оксида азота и его метаболитов (нитратов и нитритов) в биологических средах.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Организация исследования.

2.2. Анкетирование школьников без признаков атопии.

2.3. Оценка тяжести бронхиальной астмы.

2.4. Оценка качества жизни больных сезонным поллинозом.

2.5. Процедура проведения гипоксических тестов.

2.6. Методика получения конденсата выдыхаемого воздуха.

2.7. Методика получения сыворотки крови.

2.8. Методика выделение клеток крови.

2.9. Методы оценки продукции оксида азота в организме.

2.9.1. Хемилюминесцентный метод определения содержания оксида азота в выдыхаемом воздухе.

2.9.2. Анализ суммарной концентрации нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха.

2.9.3. Методика определения суммарной концентрации нитратов/нитритов в крови.

2.10. Методы оценки окислительной системы организма.

2.10.1. Изучение процессов ПОЛ в сыворотке крови.

2.11. Определение генерации радикалов кислорода в суспензии клеток с помощью хемилюминесцентных (ХЛ) измерений.

2.12. Методика определения электролитов в КВВ.

2.13. Методы статистической обработки экспериментального материала.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Выдыхаемый оксид азота при различных легочных заболеваниях.

Оксид азота и его стабильные метаболиты.

Роль активных форм азота и кислорода при обострении бронхиальной астмы.

Нитраты и нитриты в различных биологических жидкостях.

Метаболиты оксида азота в мониторинге бронхиальной астмы.

Применение метода опрделения суммарной концентрации ниратов и нитритов в КВВ для преклинической диагностики ронхиальной астмы.

Метаболизм оксида азота при поллинозе и бронхиальной астме.

Метаболизм N0 при гипоксии.

Метаболизм N0 при гипоксии.

Ошибки преаналитического этапа оценки содержания нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха.

Введение диссертации по теме «Фармакология, клиническая фармакология», Климанов, Игорь Александрович, автореферат

По данным эпидемиологических исследований, бронхиальная астма (БА) является одной из наиболее распространенных болезней в мире [Чучалин А.Г., 2004]. В последние годы отмечается неуклонный рост заболеваемости БА, особенно среди детей, увеличивается доля данного заболевания в структуре инвалидности и смертности, повышаются размеры экономического ущерба, связанного с этой болезнью [276Чучалин, 2000, Barnes P.J., 2006]. Высокая медико-социальная значимость БА диктует необходимость всестороннего изучения патогенеза, поиска эффективных методов диагностики, профилактики и лечения [Чучалин А.Г., 2004].

В патогенезе БА важную роль играет оксидативный стресс (ОС) [Barnes P.J., 2002]. На модельных системах, показано, что гиперпродукция активных форм кислорода (АФК) вызывает бронхоконстрикцию, гиперсекрецию слизи, повреждение различных клеток и др. [36, 90, 160, 206, 207,]. Однако, до настоящего времени не выявлены механизмы образования тех или иных АФК при БА, не ясно какие именно АФК реализуют обострение БА, не изучена взаимосвязь между образованием АФК и активными формами азота (АФА).

К факторам, определяющим благоприятное течение и прогноз заболевания, относится своевременная и адекватная диагностика, в том числе и преклиническая. Среди диагностических тестов в настоящее время большое внимание уделяется необременительным для пациентов, неинвазивным методикам. Одним из таких тестов, является определение оксида азота (NO) в выдыхаемом воздухе на хемилюминесцентном газовом анализаторе в режиме on line [284]. Показано, что увеличение NO при БА является диагностическим маркером этого заболевания. [97,284]. Однако, в связи с высокой лабильностью измеряемого NO, обусловленной его реакционной способностью и дороговизной анализатора, данный метод не находит широкого практического применения. С другой стороны, известно, что в организме продуцируемый NO претерпевает целый каскад превращений, приводящий к образованию стабильных соединений, таких как нитраты, нитриты, S-нитрозотиолы, нитротирозины [125, 173]. Наибольшим процентом выхода из указанных продуктов обладают нитрат- и нитрит-анионы. Изменение концентрации этих стабильных метаболитов оксида азота в респираторном тракте может быть оценено в конденсате выдыхаемого воздуха (КВВ) [95,97]. КВВ представляет собой сумму аэрозольной фракции выдыхаемого воздуха, несущей в своем составе диспергационные частицы, сорванные с поверхности дыхательных путей, и конденсированного пара воды, и отражает процессы, протекающие в респираторном тракте, воспалительные изменения и эффект лечения. Необременительность и неинвазивность процедуры получения КВВ обуславливает перспективность ее использования в пульмонологии. Тем не менее, за период с 1966 по 2002 гг. в поисковой системе MEDLINE отмечено лишь 11 работ, посвященных определению нитрит-анионов в КВВ при заболеваниях легких [109]. В связи с низким содержанием нитрит-аниона в КВВ, представляется целесообразным определение суммарной концентрации нитрат- и нитрит-анионов. Однако, до сих пор остаются неизученными возможности применения оценки уровня нитратов и нитритов для преклинической, первичной диагностики, мониторинга эффективности проводимой терапии БА. Не определены так же границы нормальных значений, не исследованы взаимосвязи продукции АФА с генерацией АФК, с тяжестью заболевания.

Цель исследования: изучение метаболизма оксида азота при бронхиальной астме и возможности применения метода определения суммарной концентрации нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха для диагностики, мониторинга и оценки эффективности проводимой терапии данного заболевания.

1. Провести сравнительный анализ между уровнем оксида азота в выдыхаемом воздухе и суммарной концентрацией нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха у здоровых добровольцев и у пациентов с бронхиальной астмой различной степени тяжести.

2.Изучить влияние продукции активных форм кислорода на уровень выдыхаемого оксида азота и суммарную концентрацию нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха при обострении бронхиальной астмы легкого течения.

3. Изучить возможность использования метода определения суммарной концентрации нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха для преклинической диагностики, мониторинга течения и эффективности проводимой терапии бронхиальной астмы.

4. Оценить динамику суммарной концентрации нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха у детей с бронхиальной астмой легкого течения при адаптации к интервальной гипоксической тренировки.

5. Изучить динамику суммарной концентрации нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха в ходе экспозиции сезонными аллергенами у больных бронхиальной астмой и поллинозом.

Впервые изучена корреляционная связь между суммарной концентрацией нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха и уровнем выдыхаемого оксида азота при различных степенях тяжести бронхиальной астмы.

Впервые проведена комплексная оценка связи между суммарной концентрацией нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха, уровнем выдыхаемого оксида азота и показателями свободнорадикального окисления в периферической крови, что способствовало выявлению роли свободнорадикальных механизмов развития обострения бронхиальной астмы легкого течения.

Впервые выявлена динамика суммарной концентрации нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха при различных степенях тяжести бронхиальной астмы на фоне базисной терапии. Обоснована возможность применения метода определения суммарной концентрации нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха для выявления групп риска по бронхиальной астме.

Впервые изучена динамика суммарной концентрации нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха у детей с бронхиальной астмой при адаптации к интервальной гипоксической тренировке.

Впервые оценено изменение суммарной концентрации нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха при сочетании бронхиальной астмы и поллиноза.

Определение суммарной концентрации нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха позволяет оценивать выраженность воспалительных изменений в респираторном тракте при бронхиальной астме и поллино-зах. Определены критерии использования метода измерения суммарной концентрации нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха для диагностики бронхиальной астмы и поллинозов. Обоснована возможность выявления групп риска развития бронхиальной астмы среди детей по концентрации нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха. Выявлено, что уровень суммарной концентрации нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха не показателен для достоверной диагностики бронхиальной астмы по степени тяжести. Установлено, что исследование концентрации нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха можно использовать для мониторинга состояния и эффективности проводимой противовоспалительной базисной и антиоксидантной терапии при бронхиальной астме.

Метод исследования суммарной концентрации нитратов и нитритов в конденсате выдыхаемого воздуха внедрен в практику в ФГУ «НИИ Пульмоно-огии» РОСЗДРАВА, кафедре терапии внутренних болезней педиатрического факультета ГОУ ВПО РГМУ РОСЗДРАВА, Военно-медицинском институте ФСБ РФ (г. Нижний Новгород), ВлГУ, 57 ГКБ г. Москвы.

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на:

XII, XIII, XIV, XV Национальных конгрессах по болезням органов дыхания (Москва, 2002, 2004, 2005, Санкт-Петербург 2003)

2 Национальном педиатрическом конгрессе «Современные технологии в педиатрической практике

Международных конгрессах: ERS Annual Congress (Vena, 2003, Glasgow, 2004, Copenhagen 2005)

Национальной «школе по свободнорадикальным механизмам патогенеза» (Суздаль, 2005)

По теме диссертации опубликованы 16 печатных работ

Диссертационная работа написана в традиционном стиле и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций и указателя литературы, который содержит 105 отечественных и 189 зарубежных источников). Диссертация изложена на 143 страницах машинописного текста. Работа иллюстрирована 28 рисунками.

источник

Каждый год из-за выхлопных газов, главным образом оксида азота (NO2), астмой заболевает 4 миллиона детей по всему миру, то есть 11000 человек в день, – таковы выводы исследования, опубликованного в научном журнале The Lancet Planetary Health.

Это первое исследование с глобальным охватом, отражающее воздействие автомобильных выхлопов на развитие астмы у детей. В нем показано, сколько новых случаев детской астмы ежегодно возникает по всему миру. Авторы констатируют: 92% случаев заболевания астмой, связанных с содержанием в воздухе NO2, приходятся на страны, где среднегодовые концентрации этого вещества ниже норм, установленных Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ). А значит, безопасных уровней оксида азота в атмосфере не существует и он опаснее для здоровья, чем принято считать.

Исследователи обратили свое внимание именно на оксид азота, потому что он считается главным поллютантом (вещество, загрязняющее среду обитания). NO2 присутствует главным образом в выхлопе дизельных двигателей, и часто его содержание значительно превышает допустимые нормы даже после скандала, получившего название «Дизельгейт» (в сентябре 2015 года выяснилось, что более 11 миллионов дизельных автомобилей концерна Volkswagen по всему миру были оснащены программным обеспечением, которое во время тестов в десятки раз занижало количество выбрасываемых в воздух вредных газов, в частности NO2).

Эпидемиологические данные доказывают, что оксид азота – главный поллютант. Однако другие вещества, содержащиеся в выхлопах, тоже вредят здоровью. В «Руководящих принципах ВОЗ по качеству воздуха» от 2005 года к их числу отнесены твердые частицы; озон; двуокись азота (NO2) и оксид серы (SO2). Все они оказывают негативное воздействие на здоровье людей.

Существует много исследований, где доказана устойчивая связь между автомобильными выхлопами и детской астмой. В одном из таких исследований, проведенном в десяти европейских странах, утверждается, что загазованность ответственна за 15% случаев обострения астмы у детей (L. Perez, C. Declercq, C. Iniguez, et al. Chronic burden of near-roadway traffic pollution in 10 European cities (APHEKOM network). – Eur Respir J, 2013; 42:594–605).

Дети, живущие в городах, чаще страдают респираторными аллергическими заболеваниями, чем сельские жители (J. Riedler, W. Eder, G. Oberfeld, M. Schrener. Austrian children living on a farm have less hay fever, asthma and allergic sensitization. – Clin Exp Allergy, 2000; 30:194–200). Группа японских ученых в своем исследовании «Распространенность аллергии на японскую криптомерию в местах ее массированного произрастания» (Ishizaki T, Koizumi K, Ikemori R, Ishiyama Y, Kushibiki E. Studies of prevalence of Japanese cedar pollinosis among residents in a densely cultivated area. – Ann Allergy 1987; 58:265–270) тоже убедительно доказала, что различными формами респираторной аллергии чаще страдают те, кто живет возле загруженных автомагистралей, чем те, кто обитает в зонах с более высокой концентрацией пыльцевых аллергенов, но вдали от дорог.

Согласно данным нового исследования, опубликованным в журнале The Lancet Planetary Health, первые три места по заболеваемости астмой среди детей из-за вредных выхлопов занимают Кувейт (550 случаев на 100 тысяч детей), Объединенные Арабские Эмираты (460) и Канада (450). США на 22-м месте (300), Великобритания – на 29-м (280). Россия делит 70-е место с Францией и Узбекистаном (180 случаев на 100 тысяч детей).

Если брать города, то наиболее высокий ежегодный прирост астмы из-за NO2 у детей отмечен в Лиме (Перу; 690 случаев на 100 тысяч детей). В десятку «лидеров» входят также Шанхай (Китай; 650), Богота (Колумбия; 580), Пекин (Китай; 560), Торонто (Канада; 550), Лос-Анджелес и Нью-Йорк (США; 530). Москва, к счастью, значительно от них отстает: здесь по причине загазованности зафиксировано 410 новых случаев астмы на 100 тысяч детей.

Однако в Москве есть другая проблема: наряду с восемью китайскими мегаполисами и Сеулом (Республика Корея) российская столица входит в десятку городов с самым высоким соотношением новых случаев детской астмы из-за вредных выхлопов и общей заболеваемости астмой у детей. На первом месте в этом списке Шанхай (48%); в Москве это соотношение составляет 40%. Ниже всего данный показатель в нигерийском городе Орлу (5,6%). Там же и самая низкая концентрация оксида азота: всего 5 единиц при максимально допустимой норме ВОЗ в 21 единицу.

Если брать в целом по странам, то самое высокое отношение новых случаев детской астмы к общей заболеваемости астмой у детей – в Республике Корея (31%). В десятку входят также Япония (23%), Бельгия (22%) и шесть ближневосточных стран, включая Саудовскую Аравию (24%). В России этот показатель составляет 18%.
В абсолютных цифрах больше всего новых случаев астмы у детей как следствие вредных выхлопов ежегодно регистрируется в Китае (760 тысяч), Индии (350 тысяч) и США (240 тысяч), потому что там высокая численность населения. В России в результате загрязненности воздуха оксидом азота астмой заболевает 50 тысяч детей в год.
Вывод исследователей: снизить заболеваемость астмой может только сокращение вредных выхлопов. Для этого нужно развивать электрический транспорт, передвигаться на велосипедах или ходить пешком.

источник

Определение оксида азота в выдыхаемом воздухе. Зачем нужно определение содержания оксида азота в выдыхаемом воздухе, цели исследования, как проводится диагностика, анализ данных

Присутствие оксида азота (NO) в живом организме было открыто в 1963 году. Его фракция в выдыхаемом воздухе имеет диагностическое значение для оценки функций дыхательной системы. Замечено, что при бронхиальной астме, поллинозах, аллергических ринитах, ХОБЛ содержание этого газа отличается от нормальной концентрации в сторону повышения. Таким образом, оксид азота является своеобразным маркером протекающих воспалительных и иных патологических процессов в лёгких и бронхах.

Определение оксида азота в выдыхаемом воздухе позволяет не только оценить тяжесть имеющейся патологии, но и проследить динамику заболевания. Зачастую ответ организма на проводимую терапию также оценивается при помощи данного исследования. Понижение концентрации оксида азота можно выявить ещё до видимых изменений в клинической картине. Метод совершенно безопасен, поскольку исключает инвазивность. Даже маленькие пациенты без труда проходят данный вид диагностики так часто, как того требует лечебная схема.

Оценка концентрации оксида азота в выдыхаемом газе целесообразна для решения следующих терапевтических задач:

• исследование и оценка тяжести эозинофильного воспалительного процесса в дыхательной системе;
• прогноз течения заболеваний дыхательных путей и ответа на предлагаемое лечение;
• динамическое наблюдение и оценка эффективности проводимой терапии;
• прогнозирование возможных обострений хронической патологии органов дыхания.

Определение содержания NO в выдыхаемом воздухе проводится пациентам для подтверждения диагноза и мониторинга при следующих заболеваниях:

• бронхиальная астма;
• ХОБЛ;
• атопическая астма;
• эозинофильный бронхит;
• аллергический ринит.

Определение содержания оксида азота в составе выдыхаемого газа производится при помощи аппаратов – газоанализаторов. Наиболее часто применяется технология оценки содержания NO, основанная на хемилюминисцентном анализе. Однако этот метод достаточно дорогой, аппарат громоздкий, что затрудняет его применение во многих медицинских учреждениях.

• электрохимический метод;
• абсорбирующая спектроскопия;
• лазерная магнитно-резонансная спектроскопия;
• выделение оксида азота и его метаболитов в конденсате выдыхаемого газа.

Такие приборы не столь громоздки. Портативные газоанолизаторы находят всё более широкое применение, поскольку диагностика на них выполняется непосредственно лечащим врачом, а дыхательные манёвры, которые требуются от пациента, достаточно просты.

По оперативности различают:

• экспресс диагностику (онлайн тесты в режиме реального времени);
• автономные методики (офлайн).

В первом случае объём оксида азота оценивается непосредственно в процессе выдоха – газ проходит через газоанализатор и выделяется интересующая фракция.

Автономные методики предполагают сбор выдыхаемого воздуха в специальный резервуар и дальнейшее его исследование.

При любой технологии необходимо обеспечить несмешивание носового и лёгочного оксида азота, поскольку в физиологических условиях NO в верхних дыхательных путях всегда образуется больше, чем в нижних.

В ряде случаев производится раздельный анализ содержания оксида азота в газе, полученном из верхних и нижних дыхательных путей.

Существуют нормативы содержания NO в выдыхаемом воздухе, однако при анализе полученных диагностических данных следует учитывать рад факторов, которые могут повлиять на результаты:

• в норме содержания NO выше у мужчин, чем у женщин;
• в детском возрасте уровень данного газа повышается по мере развития ребёнка;
• имеет место сильная корреляция содержания NO с наличием и тяжестью проявления атопии;
• уровень выдыхаемого оксида азота выше при активном и пассивном курении.

В ряде клинических ситуаций целесообразно получаемые в ходе исследования данные соотносить не с протокольными нормативами, а с показателями, которые были выявлены у того же пациента на разных этапах заболевания (в момент манифеста, в остром течении, на этапе ремиссии).

Внесение в амбулаторную карту результатов, получаемых в ходе определения содержания оксида азота в выдыхаемом воздухе, настоятельно рекомендуется, поскольку большинство больных, которым показано данное исследование, обращаются с хронической патологией. Динамическое наблюдение и анализ содержания NO позволяет на протяжении многих лет строить картину течения болезни, прогнозировать дальнейшее её развитие, оптимизировать ведение таких пациентов и вносить коррективы в терапевтическую схему.

источник

Весь контент iLive проверяется медицинскими экспертами, чтобы обеспечить максимально возможную точность и соответствие фактам.

У нас есть строгие правила по выбору источников информации и мы ссылаемся только на авторитетные сайты, академические исследовательские институты и, по возможности, доказанные медицинские исследования. Обратите внимание, что цифры в скобках ([1], [2] и т. д.) являются интерактивными ссылками на такие исследования.

Если вы считаете, что какой-либо из наших материалов является неточным, устаревшим или иным образом сомнительным, выберите его и нажмите Ctrl + Enter.

Исследование функции внешнего дыхания у больных бронхиальной астмой является обязательным и позволяет объективизировать степень бронхиальной обструкции, ее обратимость и вариабельность (суточные и недельные колебания), а также эффективность проводимого лечения.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]

Спипография — графическая регистрация объема легких во время дыхания Характерными спирографическими признаками нарушения бронхиальной проходимости у больных бронхиальной астмой являются следующие:

• снижение форсированной жизненной емкости легких (ФЖЕЛ) и объема форсированного выдоха за первую секунду (ОФВ1), причем ОФВ — наиболее чувствительный показатель, отражающий степень бронхиальной обструкции;
• снижение индекса Тиффно (соотношение ОФВ1/ЖЕЛ), как правило он менее 75%. При бронхиальной обструкции снижение ОФВ более выражено, чем ФЖЕЛ1, поэтому индекс Тиффно всегда снижается.

Измерение указанных подателей следует производить 2-3 раза и за истинное значение принимать наилучший показатель. Полученные абсолютные величины сопоставляют с должными, которые вычисляют по специальным номограммам с учетом роста, пола, возраста пациента. Кроме вышеназванных изменений спирограммы, при обострении бронхиальной астме значительно возрастает остаточный объем легких и функциональная остаточная емкость.

При частых обострениях заболевания и развитии эмфиземы легких выявляется снижение жизненней емкости легких (ЖЕЛ).

Пневмотахография регистрация в двухкоординатной системе петли «поток-объем» — скорости экспираторного потока воздуха на участке 25-75% ФЖЕЛ, т.е. у середине выдоха. С помощью этого метода рассчитывают пиковуно объемную скорость (ПОС), максимальные объемные скорости иа уровне 25%, 50%, 75% ФЖЕЛ (МОС25, МОС50, М0С75) и средние объемные скорости СОС25, 75.

По данным пневмотахографии (анализа петли «поток-объем») можно диагностировать нарушение бронхиальной проходимости на уровне крупных, средних или мелких бронхов. Для обструкции преимущественно на уровне центральных дыхательных путей, крупных бронхов характерно выраженное снижение объемной скорости форсированного выдоха в начальной части нисходящей ветви кривой «поток/объем» (ПОС и МОС25 в % к должным величинам снижены более значительно, чем MOC50 и МОС75). При периферической бронхиальной обструкции, наблюдающейся при бронхиальной астме, характерны вогнутый xaрактер кривой выдоха ц значительное снижение максимальной объемной скорости на уровне 50-75% ФЖЕЛ (МОС50, МОС75).

Определение ОФВ1 индекса Тиффно и пневмотахографию с построением кривой «поток-объем» целесообразно проводить до и после применения бронходилататоров, а также для оценки степени тяжести заболевания и контроля за течением бронхиальной астмы (2 раза в год).

Пикфлуометрия — метод измерения максимальной (пиковой) объемной скорости воздуха во время форсированного выдоха (пиковой скорости выдоха) после полного вдоха.

Показатель пиковой скорости выдоха (ПСВ) тесно коррелирует с ОФВ1. В настоящее время сконструированы и широко применяются портативные индивидуальные пикфлоуметры. Пикфлоуметрия проводится несколько раз в течение суток, до и после приема бронходилататоров. Обязательным является измерение ПСВ утром (сразу после подъема больного), затем через 10-12 ч (вечером). Пикфлоуметрия должна производиться врачом во время приема больного, а также ежедневно самим больным. Это позволяет сказать о стабильности и тяжести течения бронхиальной астмы, выявить факторы, вызывающие обострение заболевания, эффективность проводимых лечебных мероприятий.

Нормальные величины ПСВ у взрослых можно определить с помощью номограммы.

Для достоверной бронхиальной астмы характерны следующие изменения ПСВ:

• увеличение ПСВ более, чем на 15% через 15-20 минут после ингаляции бета2-стимуляторов короткого действия;
• суточные колебания ПСВ составляют 20% и более у больных, получающих бронхолитики, и 10% и более у пациентов без бронхолитической терапии;

Суточные колебания ПСВ определяются по следующей формуле:

Суточные колебания ПСВ в % (ПСВ сут в %) = ПСВ макс — ПСВ мин / ПСВ средн х 100%

• уменьшение ПСВ на 15% и более после физической нагрузки или после воздействия других триггеров.

Бронходилатационные пробы используются для уточнения степени обратимости бронхиальной обструкции. Определяют показатели ОФВ1, индекс Тиффно, показатели кривой «поток-объем» (пневмотахографии) и пикфлоуметрии до и после применения бронходилататора. О состоянии бронхиальной обструкции судят на основании абсолютного прироста ОФВ1 (Δ ОФВ1исх%)»

ΔОФВ1исх % = ОФВ1дилат (мл)-ОФВ1исх(мл) / ОФВ1исх(мл) х 100%

Примечания: ОФВ1дилат (мл) — объем форсированного выдоха за первую секунду после применения бронходилататоров; ОФВ1 исх (мл) — объем форсированного выдоха за первую секунду исходный, до применения бронходилататоров.

Специфических изменений при рентгенологическом исследовании легких не выявляется. Во время приступа бронхиальной астмы, а также при частых ее обострениях обнаруживаются признаки эмфиземы легких, повышенная прозрачность легких, горизонтальное положение ребер, расширение межреберных промежутков, низкое стояние диафрагмы

При инфекционно-зависимой бронхиальной астме рентгенологическое исследование может выявить признаки, характерные для хронического бронхита (см соответствующую главу), пневмосклероза.

Во время приступа бронхиальной астмы обнаруживаются признаки повышенной нагрузки на миокард правого предсердия: высокие остроконечные зубцы Р в отведениях II, III, aVF,V„ V„ возможен поворот сердца вокруг продольной оси по часовой стрелке (правым желудочком вперед), что проявляется появлением глубоких зубцов S в грудных отведениях, в том числе и в левых. После купирования приступа указанные ЭКГ-изменения исчезают. При тяжелом течении бронхиальной астмы, частых ее обострениях постепенно формируется хроническое легочное сердце, что проявляется ЭКГ-признаками гипертрофии миокарда правого предсердия и правого желудочка.

[8], [9], [10], [11], [12], [13], [14]

Определение газового состава артериальной крови позволяет более объективно оценить тяжесть обострения заболевания, а также является необходимым при астматическом статусе. Выраженная бронхиальная обструкция (ОФВ1 — 30-40% от должного, ПСВ

[43], [44], [45], [46], [47], [48]

1. Клиническое наблюдение и выявление глюкокортикоидной недостаточности: отсутствие эффекта при длительном лечении глюкокортикоидами, кортикозависимость, возникновение пигментации кожи, наклонность к артериальной гипотензии, ухудшение состояния (иногда развитие астматического состояния) при отмене преднизолона или уменьшении дозы.
2. Снижение содержания в крови кортизола, 11-ОКС, уменьшение выделения с мочой 17-ОКС, недостаточное повышение экскреции с мочой 17-ОКС после введения адренокортикотропного гормона, уменьшение количества глюкокортикоидных рецепторов на лимфоцитах.

[49], [50], [51]

1. Ухудшение состояния больной перед или во время менструального цикла, в связи с беременностью и во время климакса.
2. Цитологическое исследование влагалищного мазка: признаки уменьшения содержания прогестерона (неполноценность второй фазы цикла или ановуляция).
3. Измерение базальной (ректальной) температуры: снижение во вторую фазу менструального цикла.
4. Радиоиммунологическое определение содержания эстрогенов и прогестерона в плазме крови: повышение содержания эстрогенов во вторую фазу менструального цикла, нарушение соотношения эстрогены/прогестерон.

[52]

1. Тяжелое, беспрерывно рецидивирующее течение заболевания (при исключении других причин тяжести течения болезни).
2. Положительная внутрикожная проба с аутолимфоцитами.
3. Высокий уровень кислой фосфатазы в крови.
4. Положительная РБТЛ с фитогемагглютинином.
5. Снижение в крови уровня комплемента и выявление циркулирующих иммунных комплексов, противолегочных антител.
6. Наличие выраженных, часто инвалидизирующих осложнений глюкокортикоидной терапии.

[53], [54], [55], [56], [57]

1. Клиническое наблюдение — выявление факторов, способствующих формированию адренергического дисбаланса: чрезмерное применение симпатомиметиков, вирусная инфекция, гипоксемия, ацидоз, эндогенная гаперкатехоламинемия вследствие стрессовой ситуации, трансформация приступа бронхиальной астмы в астматический статус.
2. Парадоксальное действие симпатомиметиков — усиление бронхоспазма при их использовании.
3. Лабораторная и инструментальная диагностика:
   • функциональное исследование проходимости бронхов до и после ингаляции селективных бета2-адреномиметиков: отсутствие возрастания или уменьшение ФЖЕЛ, скорости выдоха после ингаляции симпатомиметика;
   • снижение степени гипергликемического ответа на адреналин, появление парадоксальных реакций (снижение уровня глюкозы в ответ на введение адреналина);
   • эозинопенический тест с адреналином: снижение эозинопенического ответа на введение адреналина (абсолютное количество эозинофилов в 1 мм 3 крови уменьшается в ответ на введение адреналина менее чем на 50 %);
   • гликогенолиз лимфоцитов: снижение степени гликогенолиза в лимфоцитах после инкубации с адреналином.

[58], [59], [60], [61]

1. Выявление нарушений нервно-психической сферы в преморбидном периоде, в процессе развития заболевания, по данным анамнеза — психологические особенности личности; наличие в анамнезе психических и черепно-мозговых травм, конфликтных ситуаций в семье, на работе, расстройств в сексуальной сфере, ятрогенных воздействий, диэнцефальных нарушений.
2. Уточнение нервно-психических патогенетических механизмов (производится психотерапевтом) — определяются истероподобный, неврастеноподобный, психастеноподобный механизмы, которые способствуют возникновению приступов удушья.

[62], [63], [64], [65], [66], [67], [68], [69], [70]

1. Нарушение бронхиальной проходимости преимущественно на уровне крупных и средних бронхов.
2. Бронхорея.
3. Высокая эффективность ингаляционных холинолитиков.
4. Системные проявления ваготонии — частое сочетание с язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки, гемодинамические расстройства (брадикардия, гипотензия), мраморность кожи, потливость ладоней.
5. Лабораторные признаки: высокое содержание в крови ацетилхолина, значительное снижение активности сывороточной холинэстеразы, повышение содержания в крови и моче циклического гуанозинмонофосфата.
6. Выявление преобладания тонуса парасимпатической нервной системы методом вариационной пульсометрии.

[71], [72], [73]

1. Клинические наблюдения — возникновение приступов удушья после физической нагрузки, при вдыхании холодного или горячего воздуха, перемене погоды, от резких запахов, табачного дыма при отсутствии доказательств ведущей роли других патогенетических механизмов, формирующих измененную реактивность.
2. Снижение показателей бронхиальной проходимости, по данным спирографии и пикфлоуметрии, пробы с вдыханием холодного воздуха, ацетилхолином, PgF2а, обзиданом.
3. Положительный ацетилхолиновый тест. Непосредственно перед исследованием готовят растворы ацетилхолина в концентрациях 0.001%; 0.01%; 0.1%; 0.5% и 1% и определяют ОФВ1 и индекс Тиффно. Затем с помощью аэрозольного ингалятора больной вдыхает аэрозоль ацетилхолина в самом высоком разведении (0.001%) в течение 3 минут (если у больного начинается кашель ранее 3 минут — ингаляцию прекращают раньше).

Через 15 минут оценивают состояние больного, производят аускультацию легких и определяют ОФВ1 и индекс Тиффно. Если по клиническим и инструментальным данным нарушений бронхиальной проходимости не выявляется, повторяют исследование со следующим разведением. Тест считается положительным, если индекс Тиффно падает на 20% и более. Даже реакция на 1% раствор учитывается как положительная. Положительный ацетилхолиновый тест патогномоничен для всех форм бронхиальной астмы.

В ряде случаев для определения гиперреактивности бронхов применяется ингаляционный гистаминовыи тест. В этом случае концентрация гистамина

Портал iLive не предоставляет медицинские консультации, диагностику или лечение.
Информация, опубликованная на портале, предназначена только для ознакомления и не должна использоваться без консультации со специалистом.
Внимательно ознакомьтесь с правилами и политикой сайта. Вы также можете связаться с нами!

Copyright © 2011 — 2019 iLive. Все права защищены.

источник